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　　化學(xué)合成的多肽抗原是小分子，本身很難具有好的抗原性，只能誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生很弱的免疫反應(yīng)，因而與載體蛋白交聯(lián)是很重要的。載體蛋白含有很多抗原決定基，能夠刺激T－幫助細(xì)胞，進(jìn)而誘導(dǎo) B－細(xì)胞反應(yīng)。用于與多肽偶聯(lián)的載體蛋白有多種，其中最常用的是keyhole limpet hemacyanin (KLH), 牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）, 卵清蛋白（ovalbumin，OVA）和牛甲狀腺球蛋白（bovine thyroglobulin，THY)。KLH具有更高的抗原性，是最為常用的多肽偶聯(lián)載體。BSA也常用來(lái)作為多肽載體，但由于BSA經(jīng)常被用做檢測(cè)試驗(yàn)的阻斷劑而使得該方法生產(chǎn)的抗體在應(yīng)用上存在著一定的局限性。

　　動(dòng)物選擇:
　　要生成好的抗體，必須選擇與抗原源差異較大的動(dòng)物。要想獲得最大的免疫反應(yīng)，絕對(duì)不能讓免疫動(dòng)物對(duì)抗原產(chǎn)生‘自體識(shí)別’。例如，要想生成抗人體蛋白的抗體，使用兔或老鼠比使用猴子要好。對(duì)于非常保守的哺乳動(dòng)物蛋白，使用鳥類動(dòng)物（如雞）效果較好。

　　動(dòng)物免疫:
　　我們通常使用弗氏佐劑（Freunds）與抗原進(jìn)行混合。第一次注射完全使用Freunds的免疫輔助劑。輔助劑與抗原聯(lián)合使用，可以提高免疫反應(yīng)，從而用較少的疫苗可以產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫反應(yīng)。佐劑可以使抗原緩慢釋放，從而產(chǎn)生持續(xù)性刺激。注射方式為多位點(diǎn)的皮下注射。每只注射動(dòng)物都要先收集免疫前血樣，以用于和以后的免疫血樣比較。所采集的血清樣本含有不同的免疫型和亞型。

　　抗體鑒定:
　　檢測(cè)抗多肽反應(yīng)是否發(fā)生的最簡(jiǎn)單方法就是抗多肽ELISA。有兩種技術(shù)可以將多肽鏈接到ELISA板上。第一種方法就是直接將多肽鏈接到盤上。但如果鏈接氨基酸恰好是抗原決定簇的一部分，則抗體無(wú)法和多肽進(jìn)一步鏈接，這樣產(chǎn)生假陰性結(jié)果的可能性增加。第二種方法則是先將多肽與載體蛋白偶合，然后將多肽－蛋白偶合體鏈接到ELISA盤上。這種鏈接方法會(huì)使抗體－多肽的結(jié)合成功率提高，因?yàn)槎嚯牟皇侵苯忧度氡P膜，因而會(huì)更加暴露給抗體。這種方法因而更可靠，可重復(fù)性更高。需要注意的是，用于該方法的載體蛋白必須不同于用于免疫偶合的載體蛋白。這樣會(huì)避免血清中抗載體蛋白反應(yīng)所導(dǎo)致的高背景反應(yīng)。